viernes, 26 de octubre de 2012

MECANISMOS GENÉTICOS REGULADORES PARA LA DIABETES MELLITUS

La regulación de la expresión de los genes está determinada por una serie de moléculas que en su conjunto modulan la activación o la represión de un gen o de un grupo de genes. Esta regulación requiere de diferentes receptores nucleares, que interactúan con el DNA en lugares específicos denominados dominios de interacción del DNA. La unión del receptor al DNA es determinada por la presencia de ligandos específicos. El resultado final de este proceso produce la activación o la represión de la expresión de un gen. Los ácidos grasos y sus derivados son unos de los ligandos de origen nutricional más importantes. Esta union de los ligandos a receptores nucleares desencadenan una gran variedad de respuestas celulares;modifican la resistencia a la insulina, regulan la presión vascular, modifican el metabolismo de los carbohidratos, etc.




sábado, 20 de octubre de 2012

TÉCNICAS MOLECULARES DE LA DIABETES MELLITUS 

Método recombinante para la producción de insulina

Primeramente se clonan los genes con la fJ-galactosidasa en el plásmido pBR322 . La recombinación de los plásmidos son amplificados en E.coli.

Se lleva acabo una transformación de la bacteria, endosnucleótidos diferentes, luego la reacción entre la proteinafJ-galyel gen de la insulina

El mecanismo de la separación de la insulina es a traves del sistema RP-HPLC (Reversed- Phase High Performance Liquid Chromatography), la cual es utilizada para separar la insulina de otras especies.Las enzimas de restricción se utilizan para cortar un plasmido abierto,1a misma enzima se utiliza para cortar e1 gen deseado fuera del cromosoma, se emparejan los dos cortes y de esa manera se forma un plásmido recombinado que lleva el gen humano que codifica para la insulina




Bibliografía

http://es.scribd.com/doc/61811916/Vol-15-27-Produccion-de-insulina-a-partir-de-organismos-bacterianos-2008


domingo, 14 de octubre de 2012


PCR UTILIZADAS PARA LA DIABETES 

PCR ARRAY


Para esta prueba se utiliza el ADN extraído del paciente, posteriormente se amplifica el gen candidato utilizando cebadores específicos de este gen, al cual se le considera un marcador molecular, pasando por diversos procesos, tales como la desnaturalización, alineamiento y extensión.
En ese contexto, los genes CAPN10 y PPARγ son los candidatos más
prometedores para diagnosticar y prevenir de manera oportuna el desarrollo de la diabetes.
       






















Los perfiles de matriz de PCR la expresión de 84 genes relacionados con la aparición, el desarrollo y progresión de la diabetes. Estos incluyen los genes que contribuyen a la obesidad, la resistencia a la insulina, el inicio precoz de la diabetes y las complicaciones de la diabetes mellitus.  El uso de PCR en tiempo real, puede ser fácil y fiable para analizar la expresión de una reunión de los genes relacionados con la diabetes.


ARTÌCULO DE PCR -RFLP  


La diabetes autoinmune es una enfermedad multifactorial causada por factores genéticos predisponentes y ambientales desencadenantes. La predisposición genética es de tipo poligénico, se ha establecido asociación con alelos polimórficos del gen DQB del sistema HLA, VNTR del gen de insulina y polimorfismos en el gen CTLA4. En el siguiente artículo se analizaron las frecuencias de los alelos polimóficos del gen HLA DQB1 en 63 pacientes LADA, 70 pacientes DMID y 79 individuos normales.

Bibliografía:
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0025-76802005000300009

http://www.postgradoeinvestigacion.uadec.mx/Documentos/AQM/MARCADORES%20MOLECULARES%20PARA%20EL%20DIAGN%C3%93STICO%20TEMPRANO%20DE%20LA%20DIABETES%20MELLITUS.pdf
  

sábado, 6 de octubre de 2012

TOMA DE MUESTRAS PARA TÈCNICAS DE BIOLOGÌA MOLECULAR


Ayuno estricto: El día previo de la toma de muestra no ingerir alimentos especialmente aquellos ricos en grasas (cerdo, cecina, frituras, mantequillas, lcteos).La última comida debe hacerse a más tardar a las 19:00hrs
Ayuno relativo: El examen puede tomarse con ayuno de 3 horas.

Hora de toma de muestra. Regla general: momento mas apropiado entre las 07:00 a las 09:00hrs, anotar hora de toma de muestra.


SITIO ALTERNATIVO PARA LA TOMA DE MUESTRAS

Se refiere a la toma de la muestra de sangre para la medición de glucosa en sangre en partes del cuerpo que no sean la punta de los dedos: más comúnmente el antebrazo, palma de la mano o muslo.
Bibliografìa

TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR DE LA DIABETES MELLITUS


METODO ELISA



En los pacientes diabéticos, las células beta que se encuentran en los islotes pancreáticos, son agredidas por células del sistema inmune. Debido a esta agresión, se generan además autoanticuerpos específicos para los componentes moleculares de las propias células beta pancreáticas, productoras de insulina. Estos autoanticuerpos, también denominados “marcadores”, comienzan a reproducirse mucho antes de que la enfermedad se manifieste. El método ELISA desarrollado trabaja mediante la detección de estos marcadores que se encuentran en la sangre, a través de dos autoantígenos recombinantes, algo alterados respecto de las moléculas naturales, y que se denominan Trx-GAD e IA-2ic.  


Bibliografía:
http://www.agencia.gov.ar/IMG/pdf/casoagencia_unnuevometododeanalisistipoelisa.pdf